PREVENCION

La prevención de la brucelosis implica la pasteurización de la leche, la inmunización de animales, y el sacrificio de los animales infectados. No existe una vacuna humana.

TRATAMIENTO

El tratamiento contra estos microorganismos consiste en una combinación de tetraciclina y rifampicina. No se ha descrito resistencias significativas e estos antibióticos.

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO

Diagnóstico de laboratorio
Para el cultivo de estos microorganismos se necesita medios de cultivo enriquecidos e incubación en atmósfera que contenga un 10% de CO2. El género Brucella puede identificarse mediante el uso de pruebas de aglutinación y anti suero contra Brucella, y las distintas especies pueden identificarse mediante pruebas bioquímicas. Si no se logra aislar los microorganismos, el análisis de una muestra de suero del paciente, puede servir para establecer el diagnóstico si se encuentra un aumento en el título de anticuerpos contra Brucella

Diagnóstico Indirecto:
• Pruebas Serológicas
Actualmente existen gran variedad de pruebas, cada una de las cuales tienen sus propias limitaciones, aplicabilidad y diferentes grados de sensibilidad y especificidad; aplicándose pruebas Tamiz (screening) seguidas por pruebas confirmatorias y definitorias.
La prueba Rosa de Bengala es la prueba tamiz de elección, obteniéndose un resultado cualitativo negativo o positivo. Debiéndose confirmar mediante las pruebas complementarias como fijación de complemento, prueba de inmunoabsorvencia ligado a enzimas (ELISA).




• Prueba Rosa de Bengala (Prueba del antígeno tamponado o de tarjeta)
Es un prueba de aglutinación muy sencilla de realizar y muy rápida, que se basa en la detección de anticuerpos contra LPS (A+M) utilizando un antígeno de B. abortus, Cepa 19, suspendido en una solución tampón de pH 3.65 + 0.05 coloreados en Rosa de Bengala. El pH ácido inhibe las Ig M, mientras que las Ig G1 son activadas.

Tiene una especificidad del 95% y una sensibilidad del 75%, además de poseer un valor predictivo muy alto, se puede realizar con suero sin diluir, obteniéndose un resultado cualitativo, negativo o positivo, que en el último caso debe ser confirmado con las pruebas complementarias.
Las reacciones falsas positivas pueden ser debidas a la actividad residual de la vacunación, a la presencia de anticuerpos maternales, a reacciones cruzadas con otras bacterias y a errores de laboratorio.

• Prueba de Fijación de Complemento
La fijación de complemento se considera el método más cercano a una prueba definitiva de infección y fiable para el diagnostico serológico confirmatorio, por sui alta sensibilidad y excelente especificidad.

Se ha podido reportar una sensibilidad del 99% y una especificidad del 100%. Esta prueba detecta anticuerpos Ig G1 y puede medir niveles basales de anticuerpos vacunales o de muchos reactivos, es lenta, muy cara y no diferencia entre un animal infectado de uno vacunado recientemente.
Para que la prueba de FC tenga validez; se tienen que efectuar en presencia de los controles de los reactivos usados, sueros negativos y positivos a diferentes diluciones; los cuales validan el resultado, mostrando la lectura esperada.


• Prueba de Aglutinación en Placa
Al igual que la prueba anterior, también es una prueba rápida y efectiva, pero esta es utilizada en lugar de aglutinación en tubo. También detecta Ig G1, Ig G2 e Ig M, pero predomina la reacción de las Igs M. normalmente el antígeno se colorea con verde brillante bilis y con cristal violeta para una mejor lectura de los resultados. Presenta una sensibilidad de 73.1% y una especificidad de 99.3%.


• Prueba de Aglutinación en Tubo
Esta prueba identifica Ig G1, Ig G2 e Ig M, siendo muy fácil de estandarizar y muy simple. Mide la cantidad total de anticuerpos aglutinados, pero es muy deficiente en la detección de Ig M (falsas positivas) y también es bastante lenta. Tiene una especificidad de 99% y una sensibilidad de 56%.


• Prueba de Inmunoanálisis enzimático (ELISA)

Se han aplicado dos tipos de principales de inmunoanálisis:
1. indirecto : La prueba de ELISA indirecta se usa eficazmente en los programas de erradicación y como prueba complementaria a la Fijación de Complemento; es una de las pruebas muy estudiadas en la última década y su aplicación es una buena opción en el control de la enfermedad con la finalidad de rebajar la cantidad de falsos negativo y/o positivas en nuestro país.
La sensibilidad y especificidad de la prueba de ELISA indirecta son excelentes, pero no puede distinguir entre la respuesta inmunitaria recibida por la vacunación y la infección natural con la bacteria. También ELISA indirecta no parece diferenciar anticuerpos producidos por Brucelas de aquellos producidos por Yersinia enterolítica.
2. competitivo: La prueba de ELISA competitiva tiene una sensibilidad del 100% y una especificidad del 99.7%, además de ser más fácil de realizar, se necesita menos tiempo y tiene la capacidad de discriminar entre anticuerpos vacunales y de campo, siendo así un método diagnostico de gran ayuda, sobre todo en animales vacunados con la bacteria.

IDENTIFICACION Y AISLAMIENTO

Las pruebas más usadas para el diagnóstico, son los hemocultivos poco después de ocurrida la infección. Por lo general se recomienda medios sólidos más que líquidos, ya que los medios sólidos hacen más fácil la identificación y el aislamiento de las colonias, restringiendo el crecimiento de mutantes rugosas. El cultivo se realiza en caldo de soya o medios agar sangre estándar.

Los medios líquidos son muy usados en el aislamiento primario de sangre y otros fluidos corporales, pero es importante hacer subcultivos tempranos en medios sólidos para detectar el crecimiento y la disociación de los microorganismos producidos por el cultivo continuo de los medios líquidos. Las tipificación y aislamiento de la B. melitensis, es el único medio seguro de diagnostico, pero se requiere de personal entrenado y mucho tiempo.

El cultivo en medio con agar-sangre o agar-chocolate, muestra el crecimiento, al cabo de 48 horas, de pequeñas colonias brillantes, de diferente tamaño y de color miel claro. Si no se observan cuidadosamente las placas, en casos con crecimiento de escaso número de colonias, se puede falsear erróneamente algún diagnóstico. Tras la tinción de Gram de estas colonias para observar su aspecto característico, se realizará la reacción de la oxidasa (positiva) y aglutinación con suero específico frente a Brucella, suficiente para identificar el aislamiento.



Morfología microscópica:
• Bacilos cortos y pequeños
• Gram negativos • Miden de 0.5x0.5 has 1.5 mm de longitud
• En la tinción de Zielh - Neelsen la brúcela se teñirá de rojo

Morfología colonia
• En medio TSA
1. Cepas lisas (B. melitensis)
2. Colonias circulares, convexas con bordes regulares y translúcidas
3. Coloración ámbar
• Pruebas bioquímicas; Para identificar la especie se procede a efectuar las siguientes pruebas bioquímicas :

CUADRO CLINICO

Tras una incubación de 1 – 3 semanas aparecen síntomas inespecíficas, como:
• Fiebre
• Escalofríos
• Fatiga
• malestares generales
• Anorexia
• Pérdida de peso

El inicio de la enfermedad puede ser agudo o gradual. El patrón de fiebre ondulante (subidas y bajadas intermitentes). Es frecuente el aumento de tamaño de los ganglios linfáticos, hígado y del bazo. Aparece pancitopenia. Las infecciones producidas por:
• B melitensis: tienden a ser más graves y prolongadas.
• B. abortus: suele ser auto limitada
La complicación más frecuente es la osteomielitis. El contagio secundario entre individuos es muy poco frecuente.

FUENTE DE INFECCION

La fuente de infección es el animal portador. La introducción en un rebaño sano se puede producir por la introducción de un animal infectado, y su persistencia se produce por la presencia de ovejas y cabras que son eliminadoras durante mucho tiempo. La eliminación se produce a través del aparato reproductor y de la leche.

• Aparato reproductor:
Las cabras, y también ovejas, infectadas, tanto si abortan como si paren con normalidad, eliminan una gran concentración de brucellas en los exudados uterinos y la placenta. En cabras infectadas se pueden encontrar bacterias durante 2 meses después del parto. El exudado vaginal de animales vírgenes o no pueden contener bacterias, pero el contagio entre animales se puede producir por una exposición tan masiva como la de una placenta infectada.

• Leche:
La mayoría de cabras infectadas elimina la bacteria en la leche durante la lactación, aunque algunas las pueden eliminar en las siguientes lactaciones.

HOSPEDADORES

Las brucellas poseen un amplio espectro de hospedadores, aunque tienen como principales reservorios naturales, fundamentalmente en zonas endémicas, a las especies rumiantes domesticas: oveja, cabra, perro, caballo, etc. así como de vida libre: bisonte, búfalo, etc. e incluso en mamíferos marinos, por lo que su trascendencia ecológica podría ser aún mayor.




Considerando las especies convencionales, estas han sufrido una adaptación a sus hospedadores específicos entre los animales domésticos, que en nuestro entorno son: B. melitensis (cabra y oveja) y B. canis (perro). Es bien sabido que la infección puede ser interespecifica; de hecho, en países como Estados Unidos, donde la brucelosis por B. abortus ha sido erradicada, está emergiendo por B. melitensis en zonas donde el ganado vacuno o el bisonte cohabitan estrechamente con ovejas o cabras. También se sabe que B. suis puede tener como reservorios al reno, liebre, bisonte o al ganado vacuno, con la consiguiente posibilidad de transmisión al ser humano.

Las brúcelas encuentran en el ser humano un hospedador accidental, pero muy receptivo, siendo B. melitensis, fundamentalmente, aunque también B. abortus, B. suis y en menor medida B. canis, los agentes causales de la brucelosis humana. No infectan al ser humano B. ovis y la especie no patógena B. neotomae, aislada del roedor del desierto neotoma lepida.

RESISTENCIA Y SUPERVIVENCIA

Brucella posee una gran capacidad para sobrevivir y persistir en el ambiente bajo condiciones apropiadas, y condiciones de baja temperatura, humedad moderada, pH cercano a la neutralidad y protección contra el sol, las brúcellas pueden sobrevivir por largos períodos aunque no existe evidencia de que los organismos se repliquen significativamente bajo estas condiciones en el suelo, agua o estiércol. En los restos de animales congelados, las bacterias sobreviven por muchos años. En materiales desecados que contengan materia orgánica, y protegidos de la luz solar, pueden retener su inefectividad por muchos años. En contraste, son bastante sensibles al calor, así una suspensión diluida de brúcelas, se destruye rápidamente al ser sometida a la pasteurización o al exponerla a temperaturas de 60°C por 30 minutos. Sin embargo, una suspensión densa es más difícil de inactivar y se debe de prolongar el tiempo de exposición al calor o someterla a temperaturas más elevadas.


Brucella es muy sensible a la radiación ionizante y se muere con rapidez al exponerla a la luz ultravioleta (5 minutos). También son sensibles, a la mayoría de los desinfectantes de uso común, a las concentraciones recomendadas con excepción de las sales cuaternarias de amonio, la susceptibilidad se reduce en presencia de materia orgánica o a bajas temperaturas. El etanol, isopropanol, iodóforos, hipoclorito diluido y el fenol al 1% son eficaces para desinfectar la piel expuesta a Brucella.


En general, Brucella es susceptible a la mayoría de los antibióticos. Las sulfonamidas, los aminoglucósidos como la estreptomicina, gentamicina, kanamicina, amikacina, tobramicina; las tetraciclinas, cloranfenicol, eritromicina, novobiocina, rifampicina y quinolonas como norfloxacina, ciprofloxacina, esparfloxacina y moxifloxacina, todos ellos son activos contra Brucella in vitro a concentraciones mínimas inhibitorias bajas. Los antibióticos beta lactámicos son los menos efectivos. Las cepas muestran alguna variación en la susceptibilidad a los antibióticos en función de su origen geográfico.

TRANSMISION

Las vías de contagio en adultos y jóvenes son:
• vía oral,
• vía nasal o conjuntival
• abrasiones en la piel por contacto con la placenta
• secreciones uterinas infectadas como las principales fuentes.

La infección de los fetos durante la gestación no conduce necesariamente a un aborto; el cabrito infectado puede nacer vivo pero débil, o puede ser totalmente viable. En algunos casos la infección persiste de forma latente hasta que alcanza la madurez sexual, cuando las hembras preñadas pueden abortar durante su primera gestación. Sin embargo, otros, si se desatan pronto y se separan del entorno infectado, no presentan la infección cuando llegan a adultos.
La infección latente también se puede adquirir por la ingestión de calostro y leche infectada; ésta es una importante vía de transmisión y de mantenimiento de la infección en un rebaño.

PATOGENIA

Las especies de Brucella son patógenas intracelulares facultativas, su virulencia está relacionada con la capacidad que poseen para resistir el efecto bactericida de los componentes del suero normal; y adherirse, penetrar y multiplicarse en una gran variedad de células eucarióticas, tanto fagocíticas como no fagocíticas.
En el ganado caprino, la B. melitensis puede hacer su ingreso por:
• Vía oral : mediante la ingesta de:
1. Pasto contaminado con brúcelas
2. Leche materna infectada en los cabritos
3. Placenta
4. Fetos abortados
5. Secreciones uterinas, etc.
También por contacto genital (servicios no controlados) y mediante fómites o vectores animados como insectos, roedores, perros, veterinarios, pastores.
Una vez que ingresa la bacteria al animal es rápidamente fagocitada por los leucocitos polimorfo nucleares neutrófilos (PMNN) en los que sobreviven y se multiplica.
La capacidad de producir ureasa aparentemente juega un papel en la colonización del huésped, a través de la ruta gastrointestinal. La enzima degrada la úrea modificando el pH en el sitio en donde se encuentre la bacteria. Además, la bacteria se adhiere con cierta facilidad a la superficie de las mucosas debido a su gran hidrofobicidad.

CARACTERISTICAS GENERALES

Las bacterias del género de Brucella tienen como características lo siguiente:
• Bacilos pequeños Gram negativos
• No capsulados
• No esporulados
• Inmóviles
• Aerobios estrictos
• Se agrupan en parejas o en cadenas cortas
• Su temperatura optima de crecimiento es 37°C
• Se necesitan de 10-100 organismos para provocan síntomas
• Se transmite por:
1. Comida infectada
2. Contacto directo con animales infectados
3. Inhalación de aerosoles
4. Consumo de productos lácteos no pasteurizados

BRUCELLA

Las zoonosis son enfermedades humanas causadas por organismos adquiridos a través de los animales.
Existen cuatro bacilos Gram negativos de importancia medica que tiene reservorio animal uno de ellos es brúcela.
Brúcela es un género de bacterias Gram negativas de la cual se conocen algunas pocas especies cada una se diferencia del huésped: